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本文標(biāo)題："紀(jì)錄螯蝦逃跑神經(jīng)的靜止電位及興奮性突觸后極化電位!"
在電生理實驗的部份,我們要紀(jì)錄螯蝦(crayfish)逃跑神經(jīng)(Lateral Giant(LG)) 的靜止電位及興奮性突觸后極化電位(excitatory postsynaptic potentiation (EPSP). 為了要有狀況良好的神經(jīng)及完整的LG迴路,我們先練習(xí)如何避免在解剖的過程中傷害到突觸間的連結(jié).熟練后儘量縮短解剖的時間,避免燈光的照射產(chǎn)熱使神經(jīng)的活性降低及膜的表面發(fā)生變化,不利玻璃電極的穿刺.
原理：
細胞會因為內(nèi)外離子濃度不等加上各種離子通道的作用,造成細胞膜內(nèi)外有微量的電位差,可以想像有一層正電離子或負電離子的薄膜分布在細胞的內(nèi)外表面。在無刺激的情形下,神經(jīng)元細胞的靜止電位(resting potential)約為-70mV。一但受到夠強烈的刺激,神經(jīng)細胞可以藉由動作電位(action potential)的產(chǎn)生長途傳遞膜電位的變化。當(dāng)兩個神經(jīng)元藉由突觸(synapse)相接,訊息便可以由前一個神經(jīng)元傳給下一個神經(jīng)元。在解剖得到的螯蝦逃跑神經(jīng)迴路中我們可以清楚的看到primary afferent及LG。若將內(nèi)含3MKCl電阻值為0-15MΩ的玻璃電極插入LG軸突的起始體節(jié)內(nèi)，將成對的銀線電極置于N234(primary afferent nerves)處，施加適當(dāng)強度的電刺激，就可以記錄到EPSPs﹔由于刺激傳遞所經(jīng)的途徑不同造成反應(yīng)產(chǎn)生的時間差，我們可以觀察到α和β兩種 EPSPs。若將刺激電極置于第五及第四神經(jīng)節(jié)之間給予適度的刺激，可紀(jì)錄到LG與MG的主動電位(action potential)。
解剖剪刀 / 鑷子 / 解剖盤 / 固定針 / Head Stage / 電極(Electrode) / 放大器(Amplifier/Filter)) / 訊號產(chǎn)生器(Stimulator) / 類比/數(shù)位轉(zhuǎn)換器(Analog/digital Converter) / 示波器(Oscilloscope) / 電腦(Computer) / 解剖顯微鏡 / 三向微細操作儀