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本文標(biāo)題:"實驗細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備,即時觀察培養(yǎng)細(xì)胞倒置式熒光顯微鏡"

新聞來源:未知 發(fā)布時間:2013-4-6 22:41:16 本站主頁地址:http://m.zulinpingtai.cn

實驗設(shè)備與實驗流程介紹

本實驗室設(shè)置有一細(xì)胞培養(yǎng)室,以方便活細(xì)胞培養(yǎng)時也同時連續(xù)擷
取細(xì)胞生長週期影像。細(xì)胞培養(yǎng)室是供體外培養(yǎng)細(xì)胞之用,主要之配備
有無菌層流操作臺(Laminar flow hood)及恒溫二氧化碳培養(yǎng)箱(CO2
incubator)。為保持操作臺之無菌(至少是低污染狀態(tài)),紫外線殺菌燈
及必要之抑菌劑均每日定時施用。為了能夠即時觀察培養(yǎng)之細(xì)胞,亦備
有一觀察用之倒立顯微鏡(Inverted microscope,ZEISS Axiovert 200)。
培養(yǎng)室內(nèi)的其他附屬設(shè)備包括二氧化碳鋼瓶、滅菌鍋、水浴槽、….等,
供細(xì)胞培養(yǎng)之必要處理手續(xù)使用。
實作上我們先將細(xì)胞經(jīng)過靜置培養(yǎng)以后,將細(xì)胞種至材料上,由于
一般細(xì)胞的觀察使用穿透光觀察細(xì)胞,然而材料可能不透光,必須對細(xì)
胞做螢光染色,接著用影像擷取系統(tǒng)做長時間的連續(xù)取像,若要在活細(xì)
胞培養(yǎng)系統(tǒng)做長時間培養(yǎng),需用活細(xì)胞做 DNA 轉(zhuǎn)殖,產(chǎn)生螢光蛋白來
觀察細(xì)胞在材料上的運動,但用 DNA 轉(zhuǎn)殖的成本過高,且本研究欲解
決的重點在于分割影像找到細(xì)胞的資訊,故先用免疫螢光化學(xué)染色方法
代替 DNA 轉(zhuǎn)殖,雖然為死細(xì)胞,但影像特性類似,皆感應(yīng)螢光的亮度
反射產(chǎn)生影像,與穿透光產(chǎn)生的相位差影像有別

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