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本文標題:"掃描電子顯微鏡能觀察細胞的三維空間結構"

新聞來源:未知 發布時間:2016-11-15 11:43:38 本站主頁地址:http://m.zulinpingtai.cn

掃描電子顯微鏡能觀察細胞的三維空間結構
  

  掃描電鏡觀察

  透射電鏡僅能研究細胞的一個薄切面,掃描電鏡則能觀察細胞的三
維空間結構,對研究細胞表面結構及染色體亞微結構都有用。

  1.培養細胞的樣品處理:生長于蓋玻片上的細胞用Palade緩沖液
或其它平衡鹽清洗2~3次。培養瓶中的細胞用橡皮刮刮下,或單純滴管
吹打,也可用胰酶消化。但胰酶消化后,細胞表面結構有改變。收集細
胞后用平衡鹽洗滌。

  2,沿管壁徐徐加入0,5嚦戊二醛,約2~4m1,邊加邊搖,以防止
細胞聚集成團,并置4℃固定半小時。

  3.加箏滲磷酸鹽緩沖液約10~15m1,洗滌,低速離心后棄去上清
液。余下適量的細胞懸液。備用。

  4.用等滲磷酸緩沖液配制的o.1g6多聚賴氨酸(分子量60,000~1
00,000)溶液滴在4mmX6mm大小洗凈烘干的蓋玻片上,室溫下靜置5~lo
min,用濾紙從邊緣吸去多余的液體。    ,

  5.當蓋玻片尚未完全千時,將上述備用的細胞懸液滴在涂有多聚
賴氨酸陽離子膜的玻片上,靜置5—30mia,用濾紙吸去多余的液體。

  6,將附有細胞的玻片放入1嚦戊二醛4℃固定山.

  7,磷酸緩沖液從玻片邊緣滴加,洗滌數次后,固定1h(4~C)。

  8.磷酸緩沖液洗滌,梯度丙酮脫水,入醋酸異戊酌。待干燥處理

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