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本文標題:"濃度的凝膠相比樣品對比分析圖像顯微鏡"

新聞來源:未知 發布時間:2017-3-12 3:02:04 本站主頁地址:http://m.zulinpingtai.cn

濃度的凝膠相比樣品對比分析圖像顯微鏡


在梯度凝膠中分離蛋白質
    與均一濃度的凝膠相比,聚丙烯酰胺濃度呈梯度增加的凝膠能
分辨的蛋白質分子質量范圍更寬,特別是小分子質量范圍的蛋白質
條帶更為清楚。與均一凝膠不同,梯度凝膠分離蛋白質更容易描繪
出分子質量為10~200kDa的線性曲線,這更有利于計算蛋白質的分
子質量。
  硫酸銨,丙烯酰胺重溶液應一直保持冰浴,以防在使用時因加入
了過硫酸銨而發生
  聚合。在梯度膠混合器的輸出閥和兩液槽之間的連通閥處于關閉
狀態時,制作一塊
  0.75 mm厚的凝膠,在儲液室加入7 m1丙烯酰胺凝膠輕(低濃度)
溶液。3.稍稍打開連通閥,讓少量(約200“1)輕溶液通過閥門流
入混合室。在混合室中加
  入7 ml丙烯酰胺凝膠重(高濃度)溶液。向兩液室的丙烯酰胺溶液
中加入特定量的
  過硫酸銨,且每7 ml溶液加入約2.3“l TEMED,并以一次性吸
管加以混勻。4.完全打開連通閥。打開磁力攪拌器,調整速率使
混合室中液體稍起漩渦即可。5.慢慢調節輸出閥,調流速至2 ml
/min。6.從夾層的頂部加入凝膠液體,將吸頭對著夾層的一面使
液體緊沿一片玻璃平板而下,
  重的液體先流入夾層,接著是逐漸越來越輕的液體。待輕溶液全
部流人輸出管時,
  要加倍注意,并調整流速以保證最后的少量液體不會很快地流入
夾層以致擾亂梯度。7.在梯度膠的頂部加入水飽和異丁醇,讓凝
膠聚合1h。

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