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本文標題:"顯微鏡培養箱成像細胞的溫度實驗圖像顯微鏡"

新聞來源:未知 發布時間:2017-3-14 1:41:44 本站主頁地址:http://m.zulinpingtai.cn

顯微鏡培養箱成像細胞的溫度實驗圖像顯微鏡

用括號中的任一儀器保持成像細胞的溫度(例如,完全封閉的顯微
鏡培養箱,循環水浴溫度控制器,獨立控制的階段加熱器,熱空氣
對流元件)。注意:這些溫度控制元件的效率和價格按照從前到后
依次遞減。3.各種可用的熒光蛋白極大地降低了成像的硬件要求
。使用標準的激發源和濾過設備能捕獲很多這些蛋白質。4.EGFP
和EYFP,作為最常用的綠色熒光蛋白,能在一定程度上抵抗光漂白
作用,但是在任何試驗中都要考慮這種現象。應該盡可能地降低這
些激發力,以延長熒光標記物的壽命。5.通常盡可能地保持蛋白
質的低表達,因為很多哺乳動物表達質粒中所用的強啟動子能引起
熒光蛋白過表達的級聯放大效應,并且熒光蛋白的桶狀結構可以使
其較弱[如水母(Aequoreavictoria)突變體]或者較強[如某些珊瑚
和異輻海葵(Disco一50maandHeteractiscrispa)突變體]地自我交
聯。6.開始實驗時,應考慮到整個研究的時間進程。如果實驗進
程很快,成像的間隔時間應該很小或為零。在這種情況下,影像掃
描和影像收集也要迅速。由于信噪比會隨所收集的光子數目的平方
根增加(即掃描時間越長,信噪比越好),增加幀頻通常可降低信噪
比。由于進程較慢的研究掃描時間更長,并且有更長的時間間隔,
因此可以減少這些限制。兩種情況均應考慮整個激發時間以減少光
漂白效應。7.使用傳統的熒光顯微鏡技術定位目的熒光細胞后,
首先調節焦距、激發水平和探測器的捕獲能力,在較短的時間內掃
描細胞,探測器可以從感興趣的焦平面獲取足夠的信號。要盡可能
快地完成這些步驟,以減輕甚至在實驗開始前就開始的光漂白效應

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