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本文標題:"神經壞死病毒帶原之點帶石斑魚螢光顯微鏡下觀察"

新聞來源:未知 發布時間:2012-2-25 15:57:18 本站主頁地址:http://m.zulinpingtai.cn

本實驗使用神經壞死病毒帶原之點帶石斑魚,將其解剖取各組織以NNV PCR以及NNV Nested PCR檢測,發現幾乎各組織皆受到神經壞死病毒的感染。由于神經壞死病毒經由血液可以檢測到,因此推測神經壞死病毒會率先感染血液裡的某些成分,而將病毒帶往全身,造成全身性的感染。 首先將血液分成血清及血球組織,NNV Nested PCR從血清中偵測不出病毒的存在。將血球細胞分離,帶原魚隻白血球以標幟神經壞死病毒為單株抗體的免疫螢光方式于螢光顯微鏡下觀察,發現不是全部的白血球皆受到神經壞死病毒的感染,且FITC螢光部位與細胞核的位置大致相同。 使用流式細胞儀,將白血球分選為淋巴球與嗜中性球兩群后,以Wright玻片染色法確定,進行神經壞死病毒的免疫螢光染色,總螢光數從1.1%提升為 97.2%,淋巴球群從3.1%提升為55.9%,嗜中性球群從1.3%提升為64.5%,以FITC螢光標記可以得出兩細胞群皆有受到病毒的感染。此兩次細胞群的螢光強度比總螢光強度少了許多,推測遭受病毒感染更為嚴重的,為第三群次細胞群,將此細胞群分選后進行免疫螢光染色,螢光數從3.6%提升為 99.2%,依其細胞大小(FSC)和顆粒的複雜度(SSC),推測為巨噬細胞。希望以此結果未來能依其白血球的表面抗原研發出相對應的拮抗物來阻斷與神經壞死病毒的結合,以幫助石斑魚體對抗病毒的侵襲。

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