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本文標題:"用于酵母孢子和細菌細胞等小型細胞的顯微鏡型號"

新聞來源:未知 發布時間:2014-4-30 14:34:16 本站主頁地址:http://m.zulinpingtai.cn

用于酵母孢子和細菌細胞等小型細胞的顯微鏡型號

    人們常用顯微操作器來分離包括酵母在內的微生物的單細胞和
單孢子.對于酵母孢子和細菌細胞等小型細胞,可以用與子囊解剖
相同的解剖針來分離.但是,對于酵母的二倍體或多倍體等大型細
胞,即便用解剖針觸著細胞并使之移動,也很難使之附著在解剖針
上。這時,一般采用微型移液管。


 一、微型移液管的制作方法
    將外徑約0.8mm的細玻璃管的一端拉細,插入金屬鞘固定,將
玻璃管垂直,具體步驟全部操作都在顯微鏡下面進行。


細胞分離操作

    操作前制備好移液管,不必再滅菌.首先,取下起保護作用的
金屬鞘,裝在用于顯微操作的支管或L型移液管夾具上.

在這種情況下,用樹脂固定插入移液管的夾具口,同時密封.在三
通口處.將其一口用橡皮管連接,橡皮管的另一端接一個約5m1的
注射器,將它做為接收器,把移液管孔向上,橡皮管用接收器臺夾
固定.


    分離技術與子囊解剖相同.也在瓊脂板上進行.把瓊脂板從培
養皿中無菌地取出,放在大型玻璃上(最好為24 X 35mm 或 24X50
mm).用接種環沽取細胞懸液點滴在瓊脂表面上,置于解剖濕室
內放置一會兒,使水分滲入瓊脂內.這時如果留有大量的水份,

則很難使微型移液管接近目的細胞。似過于干燥也不好.最好是使微
型移液管頂端接觸細胞時.處于可滑動狀態。使移液管慢慢接近于
這種狀態下的瓊脂板上的細胞,這時用左手拿注射器,加壓,加大
移液管內的氣壓,壓力過高,則會吹起泡來;而壓力過低,則由于
毛細管現象而吸收大量的細胞.所以.接觸到了細胞時,要稍稍降
低移液管內壓,使細胞滑進移液管中.由于吸進去的細胞僅僅留在
移液管的頂端部分.因此,需將移液管頂端下移.離開瓊脂表面,
然后,移動瓊脂板至適當的位置.使移液管上升,與瓊脂表面接
觸,同時提高移液管內壓.細咆就由移液管口滑出、跑到瓊脂板

上.重復操作.在一個瓊脂板上可以分離到10-20個單細胞,分離
操作終了 ,將瓊脂板從玻璃上取下.轉移到培養皿中的背養培養基
平板上,在適當的溫度下防治2-3天,等待菌落長出為止

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