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本文標題："氨基酸的混合物測量記錄精密的儀器實驗設計"
新聞來源：未知 發布時間：2016-9-26 13:37:13 本站主頁地址：http://m.zulinpingtai.cn
氨基酸的混合物測量記錄精密的儀器實驗設計
當洗脫緩沖液的pH增大時，氨基酸上面的正電荷減少，直到氨基與
樹脂的結合減弱到可以被洗下時為止。每種氨基酸達到這一點的條件是
不同的，這取決于分子上其他可電離基團的性質，在非極性氨基酸的情
況下，甚至還取決于側鏈的性質。因此利用在低pH時吸附氨基酸，然后
再慢慢提高洗脫劑的pH和離子強度，就能成功地做到重復性好而又輪廓
清楚地把所有氨基酸分開。在現代實際中，這種過程已全部自動化了。
為了容易分開，氨基酸的混合物被自動地放到一根至少含有二種類型樹
脂的柱上去。在洗脫緩沖液中，產生一種pH和離子強度的梯度，然后把
從柱底流出的氨基酸用比色測定法監控，測得的結果接著就被記錄于記
錄紙上。在最精密的儀器中，比色數據可輸入到臺式計算機，計算機自
動計算各種氨基酸的量，以及該氨基酸在原來蛋白質中的百分率，或更
通常是計算殘基數／1000殘基。
要測定一個蛋白質的氨基酸順序，必須把蛋白質斷成有限數量的較
小的肽單位。為了形成合理數量的肽以進行以后的分析，斷裂必須是專
一的和重復性好的。芳此常利用純化的蛋白酶，多半是胰蛋白酶、胰凝
乳蛋白酶和胃蛋白酶來裂解蛋白質。用這些酶去水解蛋白質只需極少量
就夠了，而且近年來已制成能把這些酶結合到不溶性的、不活潑的聚合
支持物上去的活性衍生物。使用這些不溶性的衍生物，酶就能用離心法
從水解溶液中回收并再次利用。
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