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本文標題:"握雙向瓊脂擴散實驗的基本原理-生物顯微鏡"

新聞來源:未知 發布時間:2016-10-2 13:50:57 本站主頁地址:http://m.zulinpingtai.cn

握雙向瓊脂擴散實驗的基本原理-生物顯微鏡

  可溶性抗原與相應抗體結合,在有適量電解質存在的條件下,形成
肉眼可見的沉淀物,稱為沉淀反應。根據抗原與抗體反應的環境條件及
附加因素,沉淀反應可以分為環狀沉淀、絮狀沉淀和凝膠中的沉淀反應
三種基本類型。

  在凝膠中的沉淀反應,可根據抗原與抗體反應的方式和特性分為瓊
脂擴散、免疫電泳、對流免疫電泳(亦稱反向免疫電泳或免疫電滲電泳)
和火箭免疫電泳等。現介紹雙向瓊脂擴散實驗。

  [目的]初步掌握雙向瓊脂擴散實驗的基本原理、方法、結果、分析
及臨床用途。

  [材料]甲胎蛋白陽性血清(或臍帶血),甲胎蛋白免疫血清,優質瓊
脂粉,1%疊氮鈉,吸管,載玻片,金屬打孔器(外徑3mm),微量滴管。

  [方法]

  1。用生理鹽水,制成2%瓊脂凝膠(加疊氮鈉至最后濃度為0.1%
,防腐)。    .

  2.制備瓊脂板取潔凈載玻片置平臺上,用吸管緩慢加溶化冷卻至5
0~60℃瓊脂于玻片上,每片約3.5ml,滴加時勿溢出玻片邊緣,并避
免產生氣泡,冷卻即成。

  3.打孔用打孔器打呈三角形排列的三個孔,孔間距離為3ram。孔
底補以少量瓊脂。

  4.加樣在其中一孔滴加甲胎蛋白免疫血清,另二孔分別滴加不稀
釋及1:2稀釋之甲胎蛋白。

  5.溫育加好樣品的瓊脂板置濕盒內,于37%溫箱中靜置24小時,
觀察抗原抗體產生的白色沉淀線。

  [結果]如與待檢標本產生沉淀線,該線與陽性對照所產生的沉淀線
吻接成一線則表示陽性。如無沉淀線,或與陽性對照沉淀交叉,則表示
陰性。

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