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本文標(biāo)題:"DNA的Feulgen反應(yīng)是顯微鏡下鑒別DNA的常規(guī)技術(shù)"

新聞來(lái)源:未知 發(fā)布時(shí)間:2016-11-13 23:04:12 本站主頁(yè)地址:http://m.zulinpingtai.cn

DNA的Feulgen反應(yīng)是顯微鏡下鑒別DNA的常規(guī)技術(shù)

   核酸細(xì)胞化學(xué)
    核酸細(xì)胞化學(xué)包括核酸的一般染色法、核酸的選擇性染色法和
DNA、RNA的專一性染色法等。尤其是后者,目前已發(fā)展成為基因的
原位雜交方法,可對(duì)某個(gè)基因進(jìn)行專一性的原位雜交定位

    細(xì)胞核內(nèi)一般核酸成分能顯示,其中對(duì)可能起反應(yīng)的基團(tuán)通過(guò)
乙酰化和氫硼化物還原預(yù)先加以封閉,可減少非特異性染色,而本
來(lái)可染色的非酯化磷脂,由于在三氯化銦處理前的丙酮脫水和暴露
于各種類脂溶劑而被抽提掉了。所以該法具一定的特異性,但透明
角質(zhì)顆粒、哺乳動(dòng)物精子尾巴和肥大細(xì)胞顆粒也可染上。


    DNA的Feulgen反應(yīng)是光鏡下鑒別DNA的常規(guī)方法,但在電鏡下
需把Feulgen和六亞甲四胺銀染色結(jié)合才能使DNA選擇性地顯示。固
定的組織切片在20℃下用5mol凡鹽酸處理(富爾根水解),使DNA產(chǎn)
生特異性水解而產(chǎn)生醛,用六亞甲四胺形成絡(luò)合物的堿性銀溶液測(cè)
定醛基。這種方法的原理同糖類細(xì)胞化學(xué)中過(guò)碘酸—六亞甲四胺銀
染色法相仿。這一方法具較好的特異性,因?yàn)楦粻柛馑a(chǎn)生的
醛基是特異的,而省掉水解這一步就提供了很好的對(duì)照,以區(qū)別非
特異性染色。該法中不能用四氧化織或丙烯醛作固定劑,因?yàn)檫@二
類物質(zhì)能引入可以和測(cè)定醛的試劑起反應(yīng)的基團(tuán)。

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