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本文標題:"細菌細胞壁散落在培養基計量圖像生物顯微鏡"

新聞來源:未知 發布時間:2017-1-20 12:55:05 本站主頁地址:http://m.zulinpingtai.cn

細菌細胞壁散落在培養基計量圖像生物顯微鏡


  吸去培養液,使細菌沉淀盡可能干燥。除去上清的簡便方法是用一
次性吸頭與真空相連,用吸頭接觸液面,輕緩抽吸。當液體從管中吸出
時,盡可能使吸頭遠離細菌沉淀,然后繼續用吸頭吸去附于管壁的液滴

  堿裂解提取

  1.將細菌沉淀重懸于100μL,冰預冷的溶液I中,用旋渦混合器劇
烈振蕩。須使細菌在溶液I中完全分散,為此將兩個微量離心管的底部
互相接觸并置于旋渦混合器上,同時進行振蕩,可使沉淀迅速分散。對
于有些菌株,細菌的細胞壁成分會散落在培養基中,這些成分可能抑制
限制酶的活性,為此將細菌沉淀重懸于0.5mL STE溶液,離心,所得沉
淀再如上所述重懸于100pI,冰預冷的溶液I中。

  2.加入200t-L新配制的溶液Ⅱ。蓋緊管口,快速顛倒離心管5次,
以混合內容物。應確保離心管的整個內表面均與溶液Ⅱ接觸。不要振蕩
,將離心管放置于冰上。

  3.加入150tm用冰預冷的溶液Ⅲ。蓋緊管口,將小離心管倒置后溫
和地振蕩10s使溶液Ⅲ在粘稠的細菌裂解物中分散均勻,之后將離心管
置于冰上3~5min。

  4.微量離心機于4℃以15000r/rain離心5min,將上清液轉移到另
一離心管中。

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