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本文標(biāo)題："采用懸浮培養(yǎng)細(xì)胞實驗-培養(yǎng)皿用倒置顯微鏡"
新聞來源：未知 發(fā)布時間：2018-1-30 0:31:17 本站主頁地址：http://m.zulinpingtai.cn
采用懸浮培養(yǎng)細(xì)胞實驗-培養(yǎng)皿用倒置顯微鏡
在軟瓊脂上的克隆化生長
盡管單層培養(yǎng)克隆化可應(yīng)用于從腫瘤直接培養(yǎng)的細(xì)胞，但近年
的大多數(shù)報告均采用懸浮培養(yǎng)克隆化以減少具有貼壁依賴性的基質(zhì)
細(xì)胞的生長。克隆形成檢測具有理論上的優(yōu)點，即僅在具有很強(qiáng)的
自我更新能力的細(xì)胞(可能是腫瘤細(xì)胞)中檢測反應(yīng)，而對增殖能力
有限的細(xì)胞，它構(gòu)成腫瘤的主體，則不檢測。然而，這僅在細(xì)胞集
落是真正的克隆的時候才行，并且僅在細(xì)胞克隆生長許多代以后才
進(jìn)行。遺憾的是，實際情況并非總是如此。克隆形成率通常為0．o
l％一o．1％，它可能很難排除細(xì)胞團(tuán)的出現(xiàn)。當(dāng)單層克隆化細(xì)胞
可獲得10代(一1000個細(xì)胞)時，懸浮克隆通常在4—6代后(16—64
個細(xì)胞)才可獲得。假定其中的一些克隆從3—4個細(xì)胞的細(xì)胞團(tuán)開
始，那么，傳代次數(shù)低到2次及細(xì)胞的自我更新能力就很值得懷疑
。- 但是1在軟瓊脂上的生長確定是對細(xì)胞系有用的系統(tǒng)，它具有
較高的接種率。但使用取自病人的實體瘤和滲出物進(jìn)行實驗則已碰
到許多技術(shù)問題，它仃1影響對結(jié)果的解釋。這些問題包括：較難
從表皮瘤獲得純的細(xì)胞懸液(這是克隆化生長概念的先決條件)；接
種率很低(《1％)；在某種生長條件下，貼壁依賴細(xì)胞形成克隆；
需要大量的細(xì)胞；以及克隆計數(shù)上帶有一定程度的主觀性等。這些
代表著現(xiàn)有技術(shù)的失敗而并非檢測方法的失敗。已有作者強(qiáng)調(diào)過分
離和選擇適于不同類型腫瘤細(xì)胞的生長培養(yǎng)液的最佳方法的重要性
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